Медицинская Техника / Медицинская техника №3, 2013 / с. 10-14

Определение геометрических размеров ромбоцитарных агрегатов in vitro методом цифровой микроскопии

В.А. Дубровский, И.В. Забенков, С.О. Торбин, В.И. Еремин., О.Е. Царева

Аннотация

Экспериментально демонстрируются возможности метода цифровой микроскопии (МЦМ) для регистрации агрегации тромбоцитов плазмы крови in vitro на примере взаимодействия плазмы с индуктором АДФ. Показано, что МЦМ позволяет не только регистрировать тромбоцитарные агрегаты, но и определять распределение количества тромбоцитарных агрегатов по их геометрическим размерам, оценивать величину их среднего значения. Проведен анализ зависимости этих параметров тромбоцитарных образований от соотношения объемов взаимодействующих компонентов «индуктор-плазма», причем как для образцов плазмы с нормальным или повышенным содержанием тромбоцитов, так и для случаев тромбопении, а также для образцов плазмы со слабой агрегационной активностью тромбоцитов. Эксперименты показали, что метод МЦМ обладает высокой чувствительностью – он позволяет регистрировать агрегаты, состоящие всего лишь из нескольких тромбоцитов. В то же время для этого метода характерен большой динамический диапазон – он способен регистрировать как малые агрегаты, содержащие всего лишь несколько тромбоцитов, так и те, которые включают в себя сотни клеток

Вернуться к содержанию

Сведения об авторах

Валерий Александрович Дубровский, канд. физ.-мат. наук, доцент, зав. кафедрой,
Игорь Владимирович Забенков, канд. физ.-мат. наук, ст. преподаватель,
Станислав Олегович Торбин, аспирант, кафедра медицинской и биологической физики им. В.Д. Зернова,
Вячеслав Иванович Еремин, канд. мед. наук, доцент, зав. кафедрой эпидемиологии,
Ольга Евгеньевна Царева, канд. мед. наук, зав. гематологической лабораторией клиники гематологии, Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского, г. Саратов,
e-mail: doubrovski43@yandex.ru

Список литературы

1. Podczasy J.J., Lee J., Vucenik I. // Clin. Appl. Thrombosis/ Hemostasis. 1997. Vol. 3 (3). PP. 190-195.
2. Vucenik I., Podczasy J.J. // Clin. Appl. Thrombosis/Hemostasis. 1998. Vol. 4 (4). PP. 253-256.
3. Born G.V.R. Quantitative investigation into the aggregation of blood plalets // J. Physiol. (Lond.). 1962. PP. 67P-68P.
4. O’Brien J.R. Platelets aggregation. Part II. Some results of a new study // J. Clin. Pathol. 1962. Vol. 15. PP. 452-455.
5. Zheng Yu., Solen K.A., Mohammad S.F. The light-scattering whole blood aggregometer: A novel device for assessment of platelet aggregation in undiluted blood // Arch. Pathol. Lab. Med. 1998. Vol. 122. PP. 880-886.
6. Dyszkiewicz-Korpanry A.M., Frenkel E.P., Sarode R. // Clin. Appl. Thrombosis/Hemostasis. 2005. Vol. 1 (1). PP. 25-35.
7. Cardinal D.C., Flower R.J. // J. Pharmacol. Method. 1980. Vol. 3. PP. 135-158.
8. Sbrana S., Della Pina F., Rizza A., Buffa M., De Flippis R., Gianetti J., Clerico A. // Cytometry B. Clin. Cytom. 2008. Vol. 74 (1). PP. 30-39.
9. Serebuany V.L., McKenzie M.E., Meister A.F., Fusaylov S.Y., Gurbel P.A., Atar D., Gattis W.A., O’Connor C.M. // The European Journal of Heart Failure. 2002. № 4. РР. 461-467.
10. Markosyan et al. US patent #5,071,247; 12/1991 (US Cl. 356/39: Int Cl. G01N 33/48).
11. Gabbasov Z.A., Popov E.G., Gavrilov I.Yu., Posin E.Ya. Platelet aggregation: The use of optical density fluctuations to study microaggregate formation in platelet suspension // Thromb. Res. 1989. Vol. 54 (3). PP. 215-223.
12. Gabbasov Z.A., Gavrilov I.Yu., Popov E.G. The use of optical density fluctuations for determination of platelet concentration in stirred suspension // Platelets. 1992. Vol. 3. PP. 281-282.
13. Solen K.A., Sukavaneshvar S., Zheng Y., Hanrahan B., Hall M.W., Goodman P., Goodman B., Mohammad S.F. A Light-Scattering Instrument to Detect Thromboemboli in Blood // J. Biomedical Optics. 2003. Vol. 8. PP. 70-79.
14. Doubrovski V.A., Osin A.B., Milovanov S.E. Laser space scanning in flow cytometry / Proc. SPIE «Basic applications of lasers, Qualification and localization using diffused photon in highly scattered media». 1993. Vol. 2082. P. 184.
15. Дубровский В.А., Дворецкий К.Н., Щербакова И.В., Балаев А.Э. Пространственное сканирование лазерного излучения в проточных счетчиках-анализаторах частиц // Приборы и техника эксперимента. 1999. Т. 42. № 2. С. 111-115.
16. Дубровский В.А., Ганилова Ю.А., Забенков И.В. Применение спектрально фильтрованного зондирующего светового луча и RGB разложения микрофотографий для проточной регистрации агглютинации эритроцитов, усиленной ультразвуком // Оптика и спектроскопия. 2012 (принята в печать).
17. Дубровский В.А., Торбин С.О., Елисеева А.А., Гарина К.И. Определение метрологических характеристик тромбоцитарных агрегатов методом цифровой микроскопии / Проблемы оптической физики и биофотоники. SFM-2011. Саратов. 2011. С. 8-12.
18. Rosenfeld A., Kak A.C. Digital Picture Processing. Vol. I and II. – San Diego: Academic Press, 1982.